Can Triatoma virus inhibit infection of Trypanosoma cruzi (Chagas, 1909) in Triatoma infestans (Klug)? A cross infection and co-infection study.

Triatoma virus occurs infecting Triatominae in the wild (Argentina) and in insectaries (Brazil). Pathogenicity of Triatoma virus has been demonstrated in laboratory; accidental infections in insectaries produce high insect mortality. When more than one microorganism enters the same host, the biological interaction among them differs greatly depending on the nature and the infection order of the co-existing species of microorganisms. We studied the possible interactions between Triatoma virus (TrV) and Trypanosoma cruzi (the etiological agent of Chagas disease) in three different situations: (i) when Triatoma virus is inoculated into an insect host (Triatoma infestans) previously infected with T. cruzi, (ii) when T. cruzi is inoculated into T. infestans previously infected with TrV, and (iii) when TrV and T. cruzi are inoculated simultaneously into the same T. infestans individual. Trypanosoma cruzi infection was found in 57% of insects in the control group for T. cruzi, whereas 85% of insects with previous TrV infection were infected with T. cruzi. TrV infection was found in 78.7% of insects in the control group for TrV, whereas insects previously infected with T. cruzi showed 90% infection with TrV. A total of 67.9% of insects presented simultaneous infection with both types of microorganism. Our results suggest that TrV infection could increase adhesion of T. cruzi to the intestinal cells of triatomines, but presence of T. cruzi in intestinal cells would not increase the possibility of entry of TrV into cells. Although this study cannot explain the mechanism through which TrV facilitates the infection of triatomines with T. cruzi, we conclude that after TrV replication, changes at cellular level should occur that increase the adhesion of T. cruzi.

Enveloped and non-enveloped viral-like particles in Trypanosoma cruzi epimastigotes.

Electron microscopy is routinely used to identify viral infections in protozoan parasites. These viruses have been described as non-enveloped and icosahedral structures with a diameter of 30-60 nm. Most of them are classified within the non-segmented dsRNA Totiviridae family. We observed virus-like particles (VLPs) through transmission electron microscopy in the cytoplasm of Trypanosoma cruzi epimastigotes grown in cultures. Clusters of electrodense enveloped VLPs having a diameter of 48 nm were also observed. These clusters appear to have been released from distended Golgi cisternae. Furthermore, a paracrystalline array of electrodense, non-enveloped VLPs (with a diameter of 32 nm) were found in distended Golgi cisternae or as smaller clusters at a distance from the RE or Golgi. We cannot rule out that the 48 nm enveloped VLPs belong to the ssRNA Flaviviridae family because they are within its size range. The localization of enveloped VLPs is consistent with the replication strategy of these viruses that transit through the Golgi to be released at the cell surface. Due to the size and shape of the 32 nm non-enveloped VLPs, we propose that they belong to the dsRNA Totiviridae family. This is the first description of cytoplasmic enveloped and non-enveloped VLPs in T. cruzi epimastigotes.

Algunas consideraciones diagnósticas y terapéuticas del paciente con síndrome febril en Colombia / Some considerations regarding diagnosis and therapeutics of patients with febrile syndrome in Colombia

Sr. Editor, hemos leído con gran interés la revisión realizada por Cortés et al. respecto al enfoque clínico del síndrome febril agudo en Colombia, recientemente publicada en la revista INFECTIO. A manera de contribución, en primer lugar, quisiéramos resaltar la importancia de incluir y considerar la enfermedad de Chagas (en su fase aguda) como otro de los diagnósticos diferenciales a tener en cuenta y de suma importancia, en el contexto del síndrome febril agudo en Colombia, particularmente en los últimos años.

Mr. Editor, we have read with great interest the review by Cortés et al. on the clinical approach to acute febrile syndrome in Colombia, recently published in the journal INFECTIO. As a contribution, first of all, we would like to highlight the importance of including and considering Chagas disease (in its acute phase) as another of the differential diagnoses to be taken into account and of utmost importance in the context of acute febrile syndrome in Colombia, particularly in recent years.

Triatoma virus structural polyprotein expression, processing and assembly into virus-like particles.

In contrast to the current wealth of structural information concerning dicistrovirus particle structure, very little is known about their morphogenetic pathways. Here, we describe the expression of the two ORFs encoded by the Triatoma virus (TrV) genome. TrV, a member of the Cripavirus genus of the Dicistroviridae family, infects blood-sucking insects belonging to the Triatominae subfamily that act as vectors for the transmission of Trypanosoma cruzi, the aetiological agent of the Chagas disease. We have established a baculovirus-based model for the expression of the NS (non-structural) and P1 (structural) polyproteins. A preliminary characterization of the proteolytic processing of both polyprotein precursors has been performed using this system. We show that the proteolytic processing of the P1 polyprotein is strictly dependent upon the coexpression of the NS polyprotein, and that NS/P1 coexpression leads to the assembly of virus-like particles (VLPs) exhibiting a morphology and a protein composition akin to natural TrV empty capsids. Remarkably, the unprocessed P1 polypeptide assembles into quasi-spherical structures conspicuously larger than VLPs produced in NS/P1-coexpressing cells, likely representing a previously undescribed morphogenetic intermediate. This intermediate has not been found in members of the related Picornaviridae family currently used as a model for dicistrovirus studies, thus suggesting the existence of major differences in the assembly pathways of these two virus groups.

Caracterização molecular de cepas de Trypanosoma Cruzi isolada na zona urbana da cidade de Salvador/BA / Molecular characterization of Trypanosoma cruzi isolated from strains in the urban area of the city of Salvador / Ba

A Doença de Chagas é uma infecção parasitária causada pelo protozoário flagelado Trypanosoma cruzi. As cepas de T. cruzi se constituem de uma população heterogênea, apresentando várias subpopulações. Essas populações circulam entre animais vertebrados domésticos, silvestres e humanos, além de insetos vetores. Devido a essas múltiplas relações, o T. cruzi demostra uma grande variedade biológica, genética, bioquímica e imunológica. A caracterização das cepas de T. cruzi pode utilizar várias metodologias que pode ter foco biológico, bioquímico, isoenzimático e molecular. Dentre essas, a molecular vem ganhando destaque devido a rapidez, sensibilidade e precisão do método. Deste modo, com a presente pesquisa o objetivo foi caracterizar molecularmente as cepas de Tripanosoma cruzi (Chagas 1909) isoladas em vetores e reservatórios na zona urbana de Salvador. Foram incluídas neste estudo amostras de T. cruzi isoladas de triatomíneos e reservatórios provenientes de diversas localidades da cidade de Salvador, capturados entre Julho de 2007 e Junho de 2011, perfazendo um total de 4 anos de amostragem. Adotamos a técnica de tipagem molecular do T. cruzi sugerida por Zingales et al. (2009) em sistema de eletroforese capilar. Das 930 amostras de triatomíneos avaliados, 99,35% da espécie Triatoma tibiamaculata, 482 amostras (52%)...

Chagas disease is a parasitic infection caused by the flagellate protozoan Trypanosoma cruzi. The T. cruzi strains constitute a heterogeneous population, with several subpopulations. These populations move between domestic vertebrate animals, wildlife and humans, and insect vectors. Because of these multiple relationships, T. cruzi demonstrates great biological diversity, genetic, biochemical and immunological. The characterization of T. cruzi strains can use various methodologies that may have biological, biochemical, and molecular isoenzyme focus. Among these, the molecular been gaining attention due to speed, sensitivity and precision of the method. Thus, the present study the objective was to characterize molecularly strains of Trypanosoma cruzi (Chagas 1909) isolated in vectors and reservoirs in the urban area of Salvador. Were included in this study T. cruzi samples of insects and shells from different localities of the city of Salvador, captured between July 2007 and June 2011, a total of four years of sampling. We adopt molecular typing technique of T. cruzi suggested by Zingales et al. (2009) in a capillary electrophoresis system. Of the 930 samples evaluated triatomine 99.35% of Triatoma tibiamaculata, 482 samples (52%)...

Avaliação da atividade anti-trypanosoma cruzi in vitro e in vivo de derivados de vitamina K / Evaluation of anti-Trypanosoma cruzi activity in vitro and in vivo derivatives of vitamin K

A doença de Chagas (DC) é considerada um agravo ainda negligenciado. Atualmente, estima-se cerca de 10 milhões de pessoas infectadas pelo Trypanosoma cruzi, em todo o mundo, principalmente na América Latina. Sabe-se que alguns derivados de naftoquinonas podem agir sobre a tripanotiona redutase (TR), enzima específica dos tripanossomatídeos responsável pelo controle oxidativo celular. A inibição da TR favorece um processo oxidativo e morte do protozoário. Este trabalho teve como objetivo investigar o potencial anti-T.cruzi da fitomenadiona, (K1) e menadiona (K3), ambas vitaminas K derivadas de naftoquinonas. Com este propósito, o efeito tripanocida de K1 e K3 foi avaliado através de ensaios in vitro com as formas tripomastigotas e epimastigotas do T. cruzi nas cepas Colombiana e Y utilizando os testes de inibição, citotoxicidade dos compostos, ensaio de infecção em macrófagos, avaliação de alterações ultraestruturais, bem como ensaio em in vivo para avaliação na redução da parasitemia. Os valores de IC50 mais significativos para formas tripomastigotas do T. cruzi foram 27,55 μM para K1, 2,19 μM para K3 e 12,46 μM para o benzonidazol, a droga padrão. Contudo, o tratamento com a vitamina K1 não reduziu a parasitemia in vivo, que permaneceu alta assim como a do controle tratado com veículo. A vitamina K3 foi capaz de inibir ambas as cepas e diferentes formas do parasito em ensaios in vitro. No ensaio de infecção de macrófagos, a vitamina K3 em concentração de 21,4 μM inibiu de forma mais significativa a infecção de células em relação à droga padrão, em concentração de 38,4 μM. Apesar da citotoxicidade mais elevada, esta droga apresentou uma seletividade maior ao parasito do que a células de mamíferos e, em baixas doses, causou a redução na parasitemia in vivo. As avaliações ultraestruturais por microscopia eletrônica de transmissão evidenciaram alterações celulares induzidas por estes compostos, destacando-se a tumefação do cinetoplasto e a presença de vacúolos. A quantificação ultraestrutural na avaliação por microscopia eletrônica de varredura demonstrou alterações em cerca de 80% dos parasitos observados quando tratados com K3 a 5 μM. Nossos resultados demonstram o efeito anti-T. cruzi das moléculas testadas e sugerem que estas possam servir de base para o desenho de novos compostos candidatos a fármacos para o tratamento da doença de Chagas.

Efectos de la ingestión de una dieta con alto contenido en grasas en ratas Wistar crónicamente infectadas con Trypanosoma cruzi / The effects of ingesting a high-fat diet on Wistar rats chronically infected with Trypanosoma cruzi

Se investigan los efectos de la ingestión de una dieta con alto contenido en grasas en ratas albinas (R. norvegicus) crónicamente infectadas con Trypanosoma cruzi “Planalto”, mediante pruebas de diagnóstico sero-parasitológicas, cuantificación del Índice de Masa Corporal (IMC), detección de la Proteína C Reactiva (PCR), evaluación de los niveles de lípidos plasmáticos (colesterol total, lipoproteínas de alta densidad - HDL y triglicéridos) y presencia de depósitos lipídicos en la arteria aorta. Durante el curso de la infección chagásica, se detectaron parasitemias patentes entre los 10 y 35 días pi, con un máximo promedio de 36,68±2 trips./mm³ de sangre a los 25 días. A los 90 días pi, se evidenció ausencia de parasitemias y presencia de anticuerpos IgG anti- T. cruzi. Las ratas chagásicas (A) y las sanas (C) sometidas a la dieta rica en grasas, mostraron: diferencias significativas (p<0,05) en el IMC, en comparación con los grupos de ratas sometidas a la dieta normal (B: infectadas y D: sanas); discreta reacción de la PCR en los sueros de las ratas infectadas B; aumento significativo en los niveles de colesterol total, colesterol - HDL y triglicéridos en los grupos A y C en comparación con los grupos controles B y D (p<0,05). El estudio histológico de las arterias de ratas del grupo A, reveló importantes depósitos lipídicos ubicados en la capa muscular próximos a las capas íntima y adventicia. Estos resultados sugieren que el incremento en los niveles de lípidos plasmáticos estimulado por el proceso infeccioso, son los principales mecanismos por el cual T. cruzi podría estar influyendo en la iniciación o progresión de placas ateromatosas

The effects of ingesting a high fat diet on albino rats (R. norvegicus) chronically infected with Trypanosome cruzi “Planalto” were researched using serological and parasitological diagnostic tests, body mass index (BMI) quantification, detection of C-Protein Reactive (CPR), evaluation of the plasmatic lipid levels (total cholesterol, high density lipoproteins HDL and triglycerides) and the presence of lipidic deposits in the aorta artery. During the course of the chagasic infection, patent parasitemias were detected between the ages of 10 and 35 days post-infection (pi) with a maximum average of 36.68 ± 2 tryps/mm³ of blood at 25 days. At 90 days pi, the absence of parasitemias and the presence of IgG anti T. cruzi antibodies were in evidence. The chagasic rats in chronic phase (A) and the healthy controls (C) submitted to a high fat diet showed: 1. Significant variations (p0.05) in the BMI, in comparison with the rat groups receiving a normal diet (B: infected and D: healthy rats); 2. A discrete CRP reaction in the serum of infected rats B; 3. A significant increase was shown in the total cholesterol levels, HDL cholesterol and triglycerides for groups A and C in comparison with control groups B and D (p0.05). The histological study of rat arteries in group A revealed important lipid deposits located in the muscular layer near the intimal and adventitial layer. These results suggest that the increase in plasmatic lipid levels stimulated by the infectious process are the main mechanisms through which T. cruzi could be influencing the initiation or the progression of atheromatous plaque

The cholinergic system in cyclophosphamide induced-Chagas dilated myocardiopathy in Trypanosoma cruzi infected rats: an electrocardiographic study

La Miocardiopatía Chagásica Crónica (MCC) se relaciona con el sistema colinérgico por las teorías neurogénica y autoinmune. La teoría neurogénica explica la MCC como resultado de la denervación parasimpática. La ciclofosfamida (CF) facilita el desarrollo de enfermedades autoinmunes por una depleción selectiva de las células T supresoras. En este estudio caracterizamos el reflejo vasovagal inducido por fenilefrina usando drogas colinérgicos, en dos modelos animales: ratas infectadas con Trypanosoma cruzi (TC) y ratas con MCC inducida por ciclofosfamida. 90 ratas Sprague Dawley fueron divididas en 4 grupos: Control (C), CF, TC y TCCF; los grupos TC y TCCF fueron inoculadas con 1000 tripomastigotes/g; los grupos CF y TCCF fueron tratados con CF 20 mg/kg dos veces por semana por 5 veces. Después de 6 meses de evolución de la infección, las ratas fueron sometidas a estudios electrocardiográficos (EKG), radiológicos (Rx) e histopatológicos (HP). La integridad vagal fue evaluada mediante fenilefrina y tacrina, la funcionalidad colinérgica mediante antagonistas muscarínicos selectivos. Los resultados mostraron que las ratas del grupo TCCF presentaron mayor frecuencia de trastornos electrocardiográficos, radiológicos e histopatológicos. Las ratas de los grupos TC y TCCF mostraron una respuesta disminuida a: fenilefrina que induce bradicardia refleja; metoctramina, 4-DAMP y tropicamida que inducen taquicardia; metoctramina que induce acortamiento del complejo QRS; y tropicamida que induce un alargamiento del intervalo QT. En conclusión, CF facilita el desarrollo de MCC en ratas infectadas con TC, promoviendo trastornos parasimpáticos que aparecen como consecuencia de alteraciones en la distribución de los receptores muscarínicos a diferentes niveles de integración neural.

Control de Chagas en la Argentina: su evolución / Chagass disease control in Argentina: the evolution

En 1952 se creó el Servicio Nacional de Profilaxis y Lucha contra la Enfermedad de Chagas para investigar la incidencia, conocer los índices de infestación por triatominos y propender a su eliminación. Desde 1962 trabaja el Laboratorio de Diagnóstico de Chagas, que a partir de 1973 se denomina Instituto Nacional de Diagnóstico e Investigación de la Enfermedad de Chagas Dr. Mario Fatala Chabén. En 1972 el Programa de Control incorpora un total de 19 provincias endémicas con una estrategia vertical, con lo que logra un impacto manifiesto pero sin continuidad ni contig³idad por dificultades administrativas, financieras y logísticas, por lo que difícilmente se llegaba a la fase de vigilancia y vastas zonas se reinfestaban. En 1991, la Comisión Intergubernamental contra la Enfermedad de Chagas, integrada por la Argentina, Brasil, Chile, Paraguay y Uruguay elabora un programa y un Plan de Acción Subregional para eliminar el T. infestans domiciliario e interrumpir la transmisión de T. cruzi por transfusión. En la Argentina se implementa mediante el "Programa Ramón Carrillo" con los siguientes objetivos: desinsectación de todas las viviendas del área endémica; instalación de la vigilancia con participación comunitaria y a través de múltiples efectores; detección de infección chagásica de todos los niños menores de 15 años residentes en áreas endémicas y bajo vigilancia; atención médica y tratamiento supervisado de los infectados por T. Cruzi; control de la madre chagásica y su hijo hasta el año de vida; control de laboratorio y bancos de sangre y control de dadores y receptores de trasplantes de órganos. Durante el período 1993-2003 se completó el 98 por ciento (927741 viviendas) de la meta de desinsectación en áreas de ataque y se instaló la vigilancia a través de diferentes efectores, que abarcó una cobertura superior al 87 por ciento. En 1992 se desarrolló el subprograma "Grandes Maternidades" para Diagnóstico y Tratamiento para Chagas congénito. En 1999, la probabilidad media de transmisión para el período fue del 4,88 por ciento. La tasa de infestación intradomiciliaria en áreas bajo vigilancia o recientemente instalada disminuyó en el período 1992-2003 del 6,11 por ciento al 0,95 por ciento. La seroprevalencia en niños menores de 15 años de áreas rurales en el período 1992-2003 disminuyó del 6,3 por ciento al 2,74 por ciento. En embarazadas disminuyó del 11,84 por ciento al 5,49 por ciento en el período 1994/95-2003. La situación actual de ... (AU)

Infección natural de panstrongylus rufotuberculatus con trypanosoma cruzi (kinetoplastida: trypanosomatidae) en Costa Rica / Trypanosoma cruzi (kinetoplastida: trypanosomatidae) natural infection in panstrongylus rufotuberculatus from Costa Rica

Un ejemplar hembra de T. rufotuberculatus fue colectado en el Parque Nacional "Manuel Antonio" (Puntarenas, Costa Rica). El análisis microscópico de su contenido intestinal mostró la presencia de formas de epimastigotos y tripomastigotos metacíclicos de T. cruzi. La presencia de tripomastigotos sanguíneos del parásito fue evidenciada en ratones C3H 12 días luego de la inoculación intraperitoneal de los mismos con material fecal del insecto. El presente trabajo es el primer informe en la literatura biomédica de Costa Rica sobre la presencia de T. cruzi en esta especie de vector de la enfermedad de Chagas.

Cambios en la función automática cardíaca en sujetos seropositivos a T. cruzi asintomáticos

La secuencia fisiopatológica que conduce a la enfermedad de Chagas crónica a partir de un sujeto con infección asintomática no ha sido aclarada aun. Con el fin de evaluar su función autonómica cardíaca, se estudiaron donantes de sangre clínicamente sanos sero (+)(n=34; 32,6ñ1.9 años) o sero (-) (n=22; 38,7ñ1.8 años) a T. cruzi. El grupo sero (+) se subdividió en Chagas 1 (n=22) con electrocardiograma normal y Chagas 2 (n=12), con bradicardia sinusal, bloqueos de conducción o extrasístoles ventriculares. Usando el software CAFTS (Medykro) se analizaron la frecuencia cardíaca (FC) y la presión arterial media (PAM) basales, el poder espectral (TPS) y la relación entre los componentes de baja y alta frecuencia (LF/HF), la varianza de los intervalos R-R normales (RMSSD); la disminución porcentual de la FC a la prueba de frio en cara (CFT), porcentaje de aumento de la PAM en la prueba presora al frio (CPT), y los índices FC náxima/mínima en respiración profunda controlada (DBT), de Valsava (VM) y de sensibilidad barorrefleja (BRS). Los anteriores hallazgos demuestran la existencia de trastornos de la función autonómica cardíaca previos al desarrollo de la enfermedad clínica. Una disminución de los reflejos cardiovagales asociada a un tono simpático aumentado carcterizan al seropositivo asintomático. Estos hallazgos pueden estar relacionados con el desarrollo de la cardiomiopatía chagásica

Enfermedad de Chagas en Colombia

Se brinda una revisión actualizada de la información epidemiológica de la enfermedad de Chagas en Colombia con énfasis especial sobre vectores, huéspedes, reservorios y su distribución geográfica. Se incluye un resumen de los síntomas clínicos, patología, tratamiento, diagnóstico y prevención. Se enfatiza en la importancia de las transfusiones sanguíneas en la transmisión de Trypanosoma cruzi